سيل ڪلچر جو ماحول سيل جي پيداوار کي متاثر ڪري ٿو

سيل ڪلچر جي مکيه فائدن مان هڪ آهي سيل جي پيداوار جي جسماني ڪيمسٽري کي هٿي ڏيڻ جي صلاحيت (يعني درجه حرارت، پي ايڇ، آاسموٽڪ پريشر، O2 ۽ CO2 ٽينشن) ۽ جسماني ماحول (يعني هارمون ۽ غذائي اجزاء).گرمي پد جي اضافي ۾، ثقافتي ماحول کي ترقي جي وچولي ذريعي سنڀاليو ويندو آهي.

جيتوڻيڪ ڪلچر جو جسماني ماحول ان جي فزيڪل ۽ ڪيميائي ماحول جيترو واضح نه آهي، سيرم جي اجزاء جي بهتر ڄاڻ، ترقي لاء گهربل عنصر جي سڃاڻپ، ۽ ڪلچر ۾ سيلز جي مائڪرو ماحوليات جي بهتر ڄاڻ.(يعني سيل-سيل رابطي، گيس جي ڦهلائڻ، ميٽرڪس سان رابطي) هاڻي ڪجهه سيل لائنن کي سيرم فري ميڊيا ۾ ڪلچر ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿو.

1. ثقافتي ماحول سيل جي واڌ کي متاثر ڪري ٿو
مهرباني ڪري نوٽ ڪريو ته سيل ڪلچر جون حالتون هر سيل جي قسم لاءِ مختلف آهن.
هڪ خاص سيل قسم جي حد تائين غير معمولي فينوٽائپس جي اظهار کان وٺي سيل ڪلچر جي مڪمل ناڪامي تائين ڪلچر جي حالتن کان انحراف جا نتيجا.تنهن ڪري، اسان سفارش ڪريون ٿا ته توهان سيل لائن سان واقف ٿي وڃو جنهن ۾ توهان دلچسپي رکو ٿا ۽ هر پروڊڪٽ لاءِ مهيا ڪيل هدايتن تي سختي سان عمل ڪريو جيڪي توهان پنهنجي تجربي ۾ استعمال ڪندا آهيو.

2. احتياطي تدبيرون توهان جي سيلز لاءِ هڪ بهتر سيل ڪلچر ماحول ٺاهڻ لاءِ:
ثقافت ميڊيا ۽ سيرم (وڌيڪ معلومات لاءِ هيٺ ڏسو)
پي ايڇ ۽ CO2 سطحون (وڌيڪ معلومات لاءِ هيٺ ڏسو)
پلاسٽڪ پوکيو (وڌيڪ معلومات لاءِ هيٺ ڏسو)
گرمي پد (وڌيڪ معلومات لاء هيٺ ڏسو)

2.1 ڪلچرل ميڊيا ۽ سيرم
ڪلچر ميڊيم ڪلچر جي ماحول جو سڀ کان اهم حصو آهي، ڇاڪاڻ ته اهو سيل جي واڌ لاءِ گهربل غذائي اجزاء، واڌ ويجهه جا عنصر ۽ هارمون فراهم ڪري ٿو، ۽ ڪلچر جي پي ايڇ ۽ اوسموٽڪ پريشر کي منظم ڪري ٿو.

جيتوڻيڪ ابتدائي سيل ڪلچر جا تجربا قدرتي ميڊيا استعمال ڪندي ڪيا ويا جيڪي ٽشوز جي نڪتل ۽ جسم جي رطوبت مان حاصل ڪيا ويا، معيار جي ضرورت، ميڊيا جي معيار، ۽ وڌندڙ مطالبن کي يقيني ميڊيا جي ترقي جو سبب بڻيو.ميڊيا جا ٽي بنيادي قسم آهن بيسل ميڊيا، گھٽ سيرم ميڊيا ۽ سيرم فري ميڊيا، ۽ انهن کي سيرم جي اضافي لاءِ مختلف ضرورتون آهن.

2.1.1 بنيادي وچولي
گبڪو سيل ڪلچر ميڊيم
اڪثر سيل لائينون بنيادي ميڊيا ۾ چڱي طرح وڌن ٿيون جن ۾ امينو اسيد، وٽامن، غير نامياتي لوڻ ۽ ڪاربان جا ذريعا (جهڙوڪ گلوڪوز) شامل آهن، پر اهي بنيادي ميڊيا فارموليون سيرم سان گڏ هجن.

2.1.2 سيرم وچولي گھٽتائي
گبڪو لو سيرم ميڊيم سان بوتل
سيل ڪلچر تجربن ۾ سيرم جي خراب اثرات کي گهٽائڻ لاء هڪ ٻي حڪمت عملي آهي سيرم-گهٽ ميڊيا استعمال ڪرڻ.گھٽ ٿيل سيرم ميڊيم ھڪڙو بنيادي وچولي فارمولا آھي جيڪو غذائي اجزاء ۽ جانورن مان نڪتل عنصرن ۾ مالا مال آھي، جيڪو گھٽائي سگھي ٿو سيرم جي مقدار کي گھٽائي سگھي ٿو.

2.1.3 سيرم فري ميڊيم
گبڪو سيرم فري وچولي سان بوتل
سيرم فري وچولي (SFM) مناسب غذائيت ۽ هارمون فارموليشن سان سيرم کي تبديل ڪندي جانورن جي سيرم جي استعمال کي روڪي ٿو.ڪيتريون ئي پرائمري ڪلچرز ۽ سيل لائينون سيرم فري ميڊيم فارموليشنون هونديون آهن، جن ۾ چائنيز هيمسٽر اووري (CHO) ريزومبيننٽ پروٽين پروڊڪشن لائين، مختلف هائبرڊوما سيل لائينون، insect lines Sf9 ۽ Sf21 (Spodoptera frugiperda) شامل آهن، ۽ گڏوگڏ وائرس جي پيداوار لاءِ ميزبان. (مثال طور، 293، VERO، MDCK، MDBK) وغيره. سيرم فري ميڊيم استعمال ڪرڻ جي مکيه فائدن مان هڪ آهي وچولي کي مخصوص سيل جي قسمن لاءِ ترقي جي عنصرن جي مناسب ميلاپ کي چونڊڻ جي صلاحيت.هيٺ ڏنل جدول ۾ سيرم فري ميڊيا جي فائدن ۽ نقصانن جي فهرست ڏنل آهي.

فائدو
وضاحت وڌايو
وڌيڪ مسلسل ڪارڪردگي
آسان صاف ڪرڻ ۽ هيٺيون وهڪرو پروسيسنگ
سيل جي ڪم جو صحيح اندازو لڳايو
پيداوار کي وڌايو
جسماني ردعمل جو بهتر ڪنٽرول
وڌايل سيل ميڊيا جي چڪاس
ناانصافي
سيل قسم جي مخصوص وچولي فارمولا گهرجن
اعلي reagent پاڪائي جي ضرورت آهي
ترقي ۾ سستي

2.2.1 پي ايڇ جي سطح
اڪثر عام ٿلهي جي سيل جون لائينون پي ايڇ 7.4 تي چڱي طرح وڌنديون آهن، ۽ مختلف سيل لائينن جي وچ ۾ فرق ننڍا هوندا آهن.بهرحال، ڪجهه تبديل ٿيل سيل لائينون ٿوري تيزابيت واري ماحول ۾ بهتر طور تي وڌي رهيون آهن (pH 7.0 - 7.4)، جڏهن ته ڪجهه عام فبروبلاسٽ سيل لائينون ٿوري الڪائن واري ماحول کي ترجيح ڏين ٿيون (pH 7.4 - 7.7).Insect cell lines جهڙوڪ Sf9 ۽ Sf21 pH 6.2 تي بھترين وڌندا آھن.

2.2.2 CO2 سطح
ترقي وچولي ڪلچر جي پي ايڇ کي سنڀاليندو آهي ۽ ڪلچر ۾ سيلن کي بفر ڪري ٿو pH ۾ تبديلين جي مزاحمت ڪرڻ لاءِ.عام طور تي، هي بفرنگ نامياتي (مثال طور، HEPES) يا CO2-bicarbonate تي ٻڌل بفرن تي مشتمل آهي.ڇاڪاڻ ته وچولي جي پي ايڇ جو دارومدار ڪاربن ڊاءِ آڪسائيڊ (CO2) ۽ بائيڪاربونيٽ (HCO3-) جي نازڪ توازن تي هوندو آهي، فضائي CO2 ۾ تبديليون وچولي جي پي ايڇ کي تبديل ڪنديون.تنهن ڪري، جڏهن CO2-bicarbonate-based buffer سان وچولي بفر استعمال ڪيو وڃي، اهو ضروري آهي ته خارجي CO2 استعمال ڪيو وڃي، خاص طور تي جڏهن کليل ڪلچر ڊشز ۾ سيلن کي ڪلچر ڪرڻ يا تبديل ٿيل سيل لائنن کي اعلي ڪنسنٽريشن تي ڪلچر ڪرڻ.جيتوڻيڪ اڪثر محقق عام طور تي هوا ۾ 5-7٪ CO2 استعمال ڪندا آهن، اڪثر سيل ڪلچر تجربا عام طور تي 4-10٪ CO2 استعمال ڪندا آهن.بهرحال، هر ميڊيم وٽ سفارش ٿيل CO2 ٽينشن ۽ بائيڪاربونيٽ ڪنسنٽريشن صحيح پي ايڇ ۽ آسموٽڪ پريشر حاصل ڪرڻ لاءِ آهي.وڌيڪ معلومات لاء، مھرباني ڪري ڏسو وچولي ٺاھيندڙ جي هدايتون.

2.3 پلاسٽڪ جي پوک
سيل ڪلچر پلاسٽڪ مختلف قسم جي شڪلن، سائيز ۽ سطحن ۾ موجود آهن مختلف سيل ڪلچر ايپليڪيشنن جي مطابق.استعمال ڪريو سيل ڪلچر پلاسٽڪ مٿاڇري جي گائيڊ ۽ سيل ڪلچر ڪنٽينر گائيڊ ھيٺ ڏنل توھان جي مدد لاءِ توھان جي سيل ڪلچر ايپليڪيشن لاءِ صحيح پلاسٽڪ چونڊڻ ۾.
ڏسو سڀ Thermo Scientific Nunc سيل ڪلچر پلاسٽڪ (اشتهاري لنڪ)

2.4 درجه حرارت
سيل ڪلچر لاءِ مناسب گرمي پد وڏي حد تائين ميزبان جي جسم جي گرمي پد تي منحصر هوندو آهي جتان سيلز الڳ ڪيا ويندا آهن، ۽ ٿوري حد تائين حرارت ۾ جسماني تبديلين تي (مثال طور، چمڙي جو گرمي پد ڪنڪريٽ جي عضون کان گهٽ ٿي سگهي ٿو. ).سيل ڪلچر لاءِ، اوور گرم ٿيڻ وڌيڪ گرم ٿيڻ کان وڌيڪ سنگين مسئلو آهي.تنهن ڪري، انڪيوبيٽر ۾ درجه حرارت عام طور تي وڌ کان وڌ درجه حرارت کان ٿورو هيٺ مقرر ڪيو ويندو آهي.

2.4.1 مختلف سيل لائينن لاءِ وڌ ۾ وڌ درجه حرارت
وڌ ۾ وڌ انساني ۽ ٿلهي جي سيل جون قطارون 36 ° C کان 37 ° C تي رکيل هونديون آهن بهتر واڌ لاءِ.
حشرات جي سيلن کي 27 درجا سينٽيگريڊ تي پوکيو ويندو آهي بهتر واڌ لاءِ.اهي گهٽ درجه حرارت ۽ 27 ° C ۽ 30 ° C جي وچ ۾ گرمي پد تي وڌيڪ سست وڌندا آهن.30 ° C کان مٿي، حشرات جي سيلن جي زندگي گھٽجي ٿي، جيتوڻيڪ اهو 27 ° C تي واپس اچي ٿو، سيلز بحال نه ٿيندا.
ايوان سيل لائنن کي وڌ ۾ وڌ واڌ تائين پهچڻ لاءِ 38.5°C جي ضرورت آهي.جيتوڻيڪ انهن سيلن کي 37 ° C تي رکي سگهجي ٿو، اهي وڌيڪ سست وڌندا.
ٿڌي رت وارن جانورن مان نڪتل سيل لائينون (جهڙوڪ امفيبين، ٿڌي پاڻيءَ جي مڇي) 15°C کان 26°C جي وسيع درجه حرارت جي حد کي برداشت ڪري سگهن ٿيون.